PCR实验室污染了怎么处理

时间:2021-10-09点击次数:746


出现污染后,我们**考虑可能是试剂的污染,更换新批号的HBV试剂重新检测后,结果仍为全部标本阳性。

将HBV标本拿到其他正规的PCR实验室检测,结果标本中阴、阳性结果都有,阴性对照是阴性,阳性对照是阳性,说明标本没有被污染将两种批号的HBV试剂拿到其他正规的PCR实验室检测,也显示试剂没有问题。
我实验室用消毒液擦拭工作台面后,打开所有的紫外灯照射一天,将所使用微量进样器、离心管、枪头、手套、记号笔、记录本等都更换掉,再将HBV标本进行检测,结果全部标本仍然为阳性。
用消毒液擦拭工作台面后,打开所有的紫外灯照射一天,将HBV标本重新检测,同时设置了两个阴性对照(A和B),A 阴性对照为将试剂的反应管从试剂盒中拿,打开反应管的盖子,在空气中暴露10 min,盖上盖子,上机检测;B阴性对照为将试剂的反应管从试剂盒中拿,不开盖子,直接上机检测。结果是全部标本和A阴性对照为阳性,而B阴性对照为阴性。
至此,虽然还查找不到污染源是什么,但有一点可以肯定,PCR实验室污染是气溶胶扩散而引起的后来经过调查,发现污染是由于本室工一位工作人员在打扫实验室卫生时,用扩增区的扫笤和拖把打扫了标本制备区的卫生引起。
在确定了污染的原因后,我们就开始着手排除污染,每天都打开整个PCR 实验室的门窗和排气扇,让整个实验室通风,用消毒液擦拭整个PCR实验室,打开所有的紫外灯照射。
每隔3 d按3.5步骤检测一次,一直这样处理了一个月,A阴性对照才转为阴性。连续检测三次A和B阴性对照,每次结果都均为阴性,才确定PCR实验室恢复正常。

通常我们对PCR实验室污染的预防是采取隔离不同操作区、分装试剂、改进实验操作等规则,对污染的处理是用稀盐酸擦拭或浸泡;紫外线照射法等 ]。而对于实验室的通风方面没有给予足够的重视,为了防止实验区间之间的相互污染,各个实验区间都是尽可能的密闭,从而使得实验室出现PCR产物残留污染的几率增大。从本次PCR实验室污染排除的过程来看.我觉得污染得以排除的一个关键是通风。适当的给予实验室通风,可起到空气稀释的作用,有利于PCR产物残留量的减少,加实验室污染的排除。


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