PCR实验室发生核酸气溶胶污染怎么办

时间:2021-10-09点击次数:693

常见的污染的来源

(1)试剂污染 由于在PCR试剂配制过程中,由于加样器、容器、水及其他溶液被核酸污染。

(2)设备污染 半自动核酸提取仪、全自动核酸提取仪在提取过程导致溅洒样本或者核酸模板,污染机器。或者设备内垃圾筒清洁不,残留液体或结晶挥发形成气溶胶对造成污染。

(3)标本交叉污染 可能是由于收集标本的容器被污染,标本放置时由于密封不严溢于容器外,容器外黏有标本,吸样器污染及空气中的气溶胶导致的标本间交叉污染。尤其是病毒类可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。

(4)PCR扩增产物污染 这是PCR中较常见的污染问题,常见于需要在扩增后开盖的检测项目,或者是扩增后产物处理不当,因为PCR产物拷贝量大,远远**PCR检测数个拷贝的**,所以*微量的PCR产物污染就可形成假阳性。

(5)克隆质粒的污染 在实验室操作中经常会用到阳性参考品,这些阳性参考品大多数是由某些用克隆质粒制作而成,克隆质粒在单位容积内浓度高,不小心使用*易造成污染。有些实验室自己克隆质粒做质控品,配制过程后,垃圾的处理方式不严格等,从而造成质控品对实验室的污染进而造成实验室对标本的污染。

控制污染的措施

(1)实验分区域 合理分隔实验室。将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行,特别注意标本处理及PCR产物的鉴定应与其他步骤严格分开。较好能划分:标本处理区,PCR反应液制备区,PCR循环扩增区,PCR产物鉴定区。其实验用品及吸样枪应*。实验前应将实验室用紫外线消毒以破坏残留的 DNA 或RNA。

(2) 各区物品不得混用 各个实验区域要对不同设备、物品颜色有明显的标记,如各区域使用专门的工作服、工作鞋、垃圾桶、拖把、抹布、笔等,避免不同工作区域内的设备、物品混用。使用一次性用具吸头、离心管、无粉尘手套、口罩等

(3)设置规范的空调通风系统 尽可能采用全送全排空调系统。在进入各个操作区域需要严格单向进行,即试剂准备和贮存区→样品制备区→PCR扩增区→扩增产物分析区,不得逆行。

(4)污染监测 设立阳性对照、阴性对照,进行重复试验,选择不相同区域的引物进行PCR扩增等,做好污染监测,以便采取措施防止和消除污染。

(5)定期实验室清洁 1) 日常清洁:实验前后用PCR Cleaner**清洁实验台面、*净工作台及仪器表面等容易产生核酸污染的区域(可用盒装)。2) 周/月清洁:清洁范围可扩大至:实验室墙面、试剂架、地面、玻璃、门把手及实验服等接触较多的区域(可用桶装)。


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